Molekuláris diagnózis: mi ez és mi az

A molekuláris diagnózis olyan molekuláris technikáknak felel meg, amelyek célja a DNS-változások azonosítása, amelyek például genetikai betegségekre vagy rákra utalhatnak. Ezenkívül a molekuláris technikákat széles körben alkalmazzák a fertőző betegségek azonosítására és megerősítésére, mivel gyorsabb és pontosabb diagnosztikai módszert jelentenek.

A molekuláris diagnózis drága, ezért az orvosok nem feltétlenül kérik, azonban pontos eredményt ad a változás jelenlétére vonatkozóan, hogyan befolyásolhatja a szervezet működését és a beteg válaszát a betegségre. kezelést.

Mi az?

A molekuláris diagnózis több célval is elvégezhető, a legfontosabbak:

• Leukémiával kapcsolatos mutációk azonosítása, mint például a BCR-ABL transzlokáció azonosítása, amely a krónikus myeloid leukémia (CML) jellegzetessége;
• A hematológiai betegségekre jellemző mutációk, mint például az örökletes hemochromatosis, a policythemia vera, az alapvető thrombocythemia és a thrombophilias, például - megértsék, mi a thrombophilia és hogyan történik a kezelés;
• Molekuláris változások, amelyek jelzik a rák előfordulását, például a vastagbélrák, a tüdő, a mell és az agydaganat;
• Fertőző betegségek, például hepatitis, húgycsőgyulladás, toxoplazmózis, leishmaniasis stb. Diagnosztizálása, a HPV vírus azonosítása mellett.

A molekuláris diagnózis - bár más diagnosztikai technikákkal összehasonlítva - drágának számít, pontosabb, mivel képes tájékoztatni egy bizonyos betegséggel kapcsolatos változást és a változás mértékét a szervezetben, ezáltal elősegítve a beteg kezelését.

A különféle betegségek diagnosztizálására való felhasználás mellett molekuláris technikákat alkalmaznak a kezelésre adott válasz értékelésére, különösen a rákos betegek esetében, és ez egyike a leghatékonyabb módszereknek a betegség-evolúció és a visszaesés jelzésére.

Hogyan történik

A molekuláris diagnózist bármelyik mintával elvégezhetjük, és az orvostól kérjük, hogy tájékoztasson a beteg állapotáról, amely lehet vizelet, nyál vagy nagy részében a vér. Nem szükséges gyors vagy más előkészület a vizsgálat elvégzésére.

A mintát összegyűjtik és elküldik a laboratóriumba, valamint az orvos tanácsát, amely tájékoztatja a vizsga vagy a kutatás típusát, amelyet meg kell tenni. A végrehajtott molekuláris technika függ a kért vizsgálattól, és számos olyan pontos eljárást tartalmaz, amelyek végső célja az orvos által kért változtatás jelenlétének vagy hiányának azonosítása.

Általában csak kis mennyiségű mintát használnak, a többiet tárolják, hogy szükség esetén a teszt ismétlődjön.

Lássuk, mi a fő molekuláris technika

PCR

A polimeráz-láncreakcióhoz rövidített PCR olyan molekuláris technika, amely a genetikai anyag fragmentumának amplifikálását tartalmazza, legyen az DNS vagy RNS, a mutációk azonosítására, és ezáltal a betegségek diagnózisának elősegítésére.

Ezt a technikát a genetikai anyag extrakciójából és tisztításából állítjuk elő, majd egy olyan keverékbe helyezzük, amelyben az egyik komponens olyan restrikciós enzim, amely a kért vizsgálat szerint változik, és amelynek feladata, hogy az anyagot töredékké alakítsa hogy megtalálja a lehetséges genetikai változásokat. A keveréket egy termociklerbe helyezzük, amely egy olyan berendezés, amely a szakember által a vizsgálatnak megfelelően meghatározott hőmérsékletváltozáson keresztül hat, és ily módon lehetővé teszi a genetikai fragmentum amplifikálását. A hagyományos PCR-k esetében az amplifikáció után a PCR-terméket elektroforézisnek vetik alá, amely a fragmentumok tömegére és méretére alapozott molekuláris technika, azaz ezeknek a jellemzőknek megfelelően egy sávsorozat keletkezik, amelynek elemzése amely a pozitív kontroll sávján alapul, vagyis a sávban, amelyről ismert, hogy megfelel a genetikai változásnak.

A valós idejű PCR, amelyet qPCR-nek is neveznek, egyfajta kvantitatív PCR, vagyis a genetikai változás azonosítása mellett képes információt szolgáltatni a génexpresszióról, vagyis mennyiben változik a módosított gén a szervezetben, és így használható a diagnózis elősegítésére és a kezelés monitorozására. A valós idejű PCR nem igényel elektroforézist, a genetikai anyag amplifikációjának és elemzésének teljes folyamatát egy készülék végzi, és az eredményt egy képzett egészségügyi szakember értelmezi.

szekvenálás

A szekvenálás olyan molekuláris technika, amely a DNS nukleotidszekvenciájának meghatározását tartalmazza. A szekvenálás PCR-szerű reakcióból történik, azonban az amplifikációs keverékben fluorokróm hozzáadásával módosított nukleotidokat adunk hozzá, hogy amint az anyag amplifikálódik, a módosított nukleotidok beépülnek a DNS-be, és több fragmenst termelnek, amelyek megfelelnek a szekvenálás termékeinek.

A reakcióterméket egy DNS-szekvenáló berendezésbe helyezzük, ahol a fragmenseket a készülék lézerében ürítik, a fluorokrómok gerjesztettek, emittáló fluoreszcenciát mutatnak, amelyet a készülék mutat csúcsok segítségével, mindegyik megfelelő csúcsot nukleotidhoz. A reakció végén a berendezés tájékoztatja a DNS-szekvenciát, ezáltal segíti az orvost a genetikai betegségek diagnózisában.